儀器介紹
該流式細胞儀為廣州中醫藥大學基礎醫學院中西醫結合基礎研究中心儀器,本文對儀器基本參數、使用規范及操作流程進行簡要介紹。BD C5流式細胞儀只有一個激光器,配有三個熒光通道,FL1、FL2、FL3,可以進行 V/PI凋亡檢測、ROS檢測等基本實驗,具有方便快捷的特點。若需要進行更加復雜的檢測可使用中心另一臺。
開機前的準備黃色瓶子
(凈化濃縮液) Cat No. : Add of to 180 ml of water.
把對應的瓶子清洗干凈,如果有臟東西就用刷子刷干凈后再純水潤洗,清洗干凈后倒一瓶凈化濃縮液進去,然后用純水加滿瓶子混勻即可。
綠色瓶子
(清潔濃縮液) Cat No. : Add 3 ml to 197 ml of water. be used 2 weeks.
加3ml清潔濃縮液至對應的瓶子中,然后補滿純水即可,稀釋后的溶液應在2周內用完。
藍色瓶子
(抑菌濃縮液) Cat. No. :Add of to 1.0L of water.
加一瓶抑菌濃縮液至1L純水中bd流式細胞儀分析軟件,稀釋后的溶液當做鞘液來用,裝鞘液的瓶子大概是2L體積,倒兩瓶抑菌濃縮液進去再補滿純水即可。
儀器開機開啟儀器電腦啟動軟件樣本檢測
上樣前,確認樣本細胞是否已過濾(70um孔徑濾網過濾),去除樣本中的細胞團塊,以防止管路堵塞;上樣時需要混勻樣本。每個樣品上機前可先點擊1次清洗后再跑下一個樣品以排除上一個樣品的殘留。
設置上樣條件
放置樣品于上樣處bd流式細胞儀分析軟件,如下圖,可以設置無限制地跑,也可以設置顆粒()數目、時間或體積的限制;上樣速度有三種,低中高,可在處設置;
畫圖設門數據導出
如下圖所示,點擊File- All as FCS即可將數據導出為通用的FCS流式數據文件,方便后續通過進行數據分析及作圖;
也可以在自己電腦上安裝BD C6 軟件后在自己電腦上進行導出處理。
實驗后的清洗及關機儀器收費標準
儀器按使用時長進行計費